接种猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV

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题目：接种猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时间肺脏和淋巴组织中病毒载量及细胞靶点鉴定

摘要：16头6周龄猪只采用气雾剂接种欧洲型PRRSV。接种后3天、14天、21天、35天、42天和82天(DPI)，在肺脏和淋巴组织中进行病毒滴定和免疫荧光。接种后3天在肺泡巨噬细胞、肺脏、扁桃体、脾脏、咽后淋巴结、支气管淋巴结和胸主动脉淋巴结处检测到PRRSV的复制。在这些组织中除咽后淋巴结和胸主动脉淋巴结外，接种后14天检测到PRRSV阳性。肺脏和肺泡巨噬细胞直至接种后35天才检测到PRRSV阳性。在心脏、外周血单核细胞和骨髓细胞中未检测到PRRSV。在接种后3-28天检测到病毒血症。即使在感染急性期，肺泡巨噬细胞的PRRSV阳性率也不超过2%。使用猪巨噬细胞特异性单克隆抗体鉴定出感染细胞80%-94%是巨噬细胞。在淋巴结和脾脏，感染细胞%是巨噬细胞。接种后7天采用ELISA法检测抗-PRRSV抗体。抗体滴度逐渐增加，在接种后35天达到平均滴度。该水平一直保持到研究结束。

这些发现清楚地表明PRRSV对巨噬细胞具有趋向性。PRRSV主要在感染急性期在淋巴组织和肺部的巨噬细胞中复制，并持续存在巨噬细胞。

表1：接种后血清中PRRS病毒滴度

注释：KilledDPI：接种后第几天被处死

Virustitres(log10TCID50/mlserum)after...daysinoculation：接种后第几天病毒滴度(log10TCID50/ml血清)

Euthanatizedatthatday:当天实施安乐死

表2：接种后不同组织的PRRS病毒滴度

注释：KilledDPI：接种后第几天被处死

Virustitres(log10TCID50/gtissueorcells)in：病毒滴度(log10TCID50/g组织或个细胞)

Lungs：肺脏

alveolarmacrophages:肺泡巨噬细胞

Apical：肺尖叶

Cardiac：肺心叶

Diaphragmatic：肺隔叶

Lymphnodes：淋巴结

Retropharyngeal：咽后淋巴结

Bronchial：支气管淋巴结

Thoracicaortic：胸主动脉淋巴结

Tonsils：扁桃体

Spleen：脾脏

表3：使用免疫荧光法检测组织中PRRSV抗原阳性细胞

注释：KilledDPI：接种后第几天被处死

Viralantigenpositivecellsin：病毒抗原阳性细胞

Lungs：肺脏

alveolarmacrophages:肺泡巨噬细胞

Apical：肺尖叶

Cardiac：肺心叶

Diaphragmatic：肺隔叶

Lymphnodes：淋巴结

Retropharyngeal：咽后淋巴结

Bronchial：支气管淋巴结

Thoracicaortic：胸主动脉淋巴结

Tonsils：扁桃体

Spleen：脾脏

表4：双重免疫荧光确定PRRSV抗原阳性细胞中巨噬细胞的比例和百分比

注释：KilledDPI：接种后第几天被处死

NumberofbothPRRSVandmAb.2positivecells/numberofPRRSVpositivecells(%)：PRRSV和mAb.2阳性细胞数量/PRRSV阳性细胞数量(%)

Alveolarmacrophages：肺泡巨噬细胞

Lungs：肺脏

Lymphnodes：淋巴结

Tonsils：扁桃体

Spleen：脾脏

表5：接种PRRSV后抗-PRRSV抗体滴度

注释：KilledDPI：接种后第几天被处死

AntibodyELISAtiterat...daysafterinoculation：接种后…天抗体滴度

Killedatthatday：在这天被处死